ВПЛИВ КОНФОРМАЦІЙНИХ ЗМІН У МОЛЕКУЛІ АЛЬБУМІНУ (BSA) НА СПЕКТРАЛЬНІ ВЛАСТИВОСТІ СКВАРАЇНОВОГО ТА ДИЦІАНОМЕТИЛЕН-СКВАРАЇНОВОГО БАРВНИКІВ
DOI:
https://doi.org/10.18524/2304-0947.2018.3(67).140802Ключові слова:
сквараїнові барвники, альбумін, конформація, флуоресценція, FRETАнотація
Досліджено вплив конформаційних змін в молекулі сироваткового альбуміну бика (BSA) на спектральні властивості сквараїнового барвника Sq1 при ковалентному та нековалентному зв’язуванні з BSA; диціанометиленового сквараїнового барвника Sq2 при нековалентному зв’язуванні з BSA; а також можливість використання ферстерівського резонансного переносу енергії (FRET) між барвниками Sq1 (донор) і Sq2 (акцептор) для флуоресцентного моніторингу конформаційних змін в молекулі BSA. Конформаційні зміни ініціювали сечовиною в концентраціях до 8 М. Барвник Sq1 поглинає і випромінює у водному середовищі при 635 нм і 645 нм, а барвник Sq2 – відповідно, 654 нм і 670 нм. Встановлено, що ковалентне зв’язування барвників Sq1 і Sq2 з BSA, а також утворення їх комплексів з BSA приводять до довгохвильового зсуву смуг поглинання і флуоресценції, та зростання квантового виходу флуоресценції. Розгортання молекули BSA зменшує інтенсивність флуоресценції у комплексі барвника Sq2 з BSA в три рази, а зміна інтенсивності флуоресценції барвника Sq1 у кон’югаті з BSA складає лише 20%. У той же час, ефективність переносу енергії (FRET) з барвника-донора Sq1, кон’югованого з BSA, на некон’югований барвник-акцептор Sq2 зменшується при конформаційних змінах в BSA значно більше, приблизно в 10 разів. Таким чином, метод FRET є найбільш чутливим і може бути запропонований для моніторингу конформаційних змін в молекулах BSA.Посилання
Lakowicz J.R. Principles of Fluorescence Spectroscopy. – 3rd ed., Springer, 2006, 960 p.
Szöllősi J., Damjanovich S., Mátyus L. Application of Fluorescence Resonance Energy Transfer in the Clinical Laboratory: Routine and Research. Cytometry (Communications in Clinical Cytometry), 1998, vol. 34,pp. 159–179. https://doi.org/10.1002/(SICI)1097-0320(19980815)34:4<159::AID-CYTO1>3.0.CO;2-B
Carrell R.W., Lomas D.A. Conformational disease. Lancet, 1997, vol. 350, pp. 134–138. https://doi.org/10.1016/S0140-6736(97)02073-4
Ellisdon A.M., Bottomley St.P. The Role of Protein Misfolding in the Pathogenesis of Human Diseases. Life,2004, vol. 56, no 3, pp. 119–123. https://doi.org/10.1080/15216540410001674003
Carrell R.W. Cell toxicity and conformational disease. Trends in Cell Biology, 2005, vol. 15, no 11, pp. 574–580. https://doi.org/10.1016/j.tcb.2005.09.005
Dorh N., Zhu1 Sh., Dhungana K. B., Pati R., Luo F.-T., Liu H., Tiwari A. BODIPY-based fluorescent probes for sensing protein surface-hydrophobicity. Scientific Reports, 2015, vol. 5, 18337. https://doi.org/10.1038/srep18337
Oushiki D., Kojima H., Takahashi Y., Komatsu T., Terai T., Hanaoka K., Nishikawa M., Takakura Y., Nagano T. Near-Infrared Fluorescence Probes for Enzymes Based on Binding Affinity Modulation of Squarylium Dye Scaffold. Analyt. Chem., 2012, vol. 84, pp. 4404−4410. https://doi.org /10.1021/ac300061a
Maiti J., Biswasa S., Chaudhurib A., Chakraborty S., Chakraborty S., Das R. Environment Sensitive Fluorescent Analogue of Biologically Active Oxazoles Differentially Recognizes Human Serum Albumin and Bovine Serum Albumin: Photophysical and Molecular Modeling Studies. Spectrochimica Acta Part A: Molecular and Biomolecular Spectroscopy, 2017, vol. 175, pp. 191–199. https://doi.org/10.1016/j.saa.2016.12.032
Govor I.V., Tatarets A.L., Obukhova O.M., Terpetschnig E.A., Gellerman G., Patsenker L.D. Tracing the conformational changes in BSA using FRET with environmentally-sensitive squaraine probes. Methods Appl. Fluoresc., 2016, vol. 4, 024007. https://doi.org/10.1088/2050-6120/4/2/024007
Brennan J.M., Hollingshead S.E., Wilker J.J., Liu J.C. Critical factors for the bulk adhesion of engineered elastomeric proteins. R. Soc. Open. Sci., 2018, vol. 5, 171225. https://dx.doi.org/10.6084/m9.figshare.c.4079948
Das A., Mukhopadhyay Ch. Urea-Mediated Protein Denaturation: A Consensus View. J. Phys. Chem. B, 2009,vol. 113, pp. 12816–12824. https://dx.doi.org/ 10.1021/jp906350s
Tatarets A.L., Fedyunyayeva I.A., Dyubko T.S., Povrozin Ye.A., Doroshenko A.O., Terpetschnig E.A., Patsenker L.D. Synthesis of water-soluble, ring-substituted squaraine dyes and their evaluation as fluorescent probes and labels. Anal. Chim. Acta., 2006, vol. 570, no 2, pp. 214–223. https://doi.org/10.1016/j.aca.2006.04.019
Volkova K.D., Kovalska V.B., Tatarets A.L., Patsenker L.D., Kryvorotenko D.V., Yarmoluk S.M. Spectroscopic study of squaraines as protein-sensitive fluorescent dyes. Dyes and Pigments., 2007, vol. 72, no 3, pp. 285–292. https://doi.org/10.1016/j.dyepig.2005.09.007
Bannwarth W., Knorr R. Formation of carboxamides with N,N,N′,N′-tetramethyl(succinimido)uranium tetrafluoroborate in aqueous / organic solvent systems. Tetrahedron Lett., 1991, Vol. 32, N 9, pp. 1157–1160. https://doi.org/10.1016/S0040-4039(00)92032-X
Knorr R., Trzeciak A., Bannwarth W. New coupling reagents in peptide chemistry. Tetrahedron Lett., 1989, vol.30, no 15, pp. 1927–1930. https://doi.org/10.1016/S0040-4039(00)99616-3
Lin Yu., Weissleder R., Tung Ch.-H. Novel near-infrared cyanine fluorochromes: synthesis, properties, and bioconjugation. Bioconjugate Chem., 2002, vol. 13, no 3, pp. 605–610. https://doi.org/10.1021/bc0155723
Parker C.A., Photoluminescence of solutions. Elsevier, Amsterdam, 1968, 544 p.
Mujumdar R.B., Ernst L.A., Mujumdar S.R., Lewis Ch.J., Waggoner A.S. Cyanine dye labeling reagents: sulfoindocyanine succinimidyl esters. Bioconjugate Chem., 1993, vol. 4, pp. 105–111. https://doi.org/10.1021/bc00020a001
Warren J.R., Gordon Ju.A. On the Refractive Indices of Aqueous Solutions of Urea. Phys. Chem., 1966, vol. 70, no 1, pp. 297–300. https://doi.org/10.1021/j100873a507
Mujumdar S.R., Mujumdar R.B., Grant Ch.M., Waggoner A.S. Cyanine-labeling reagents: Sulfobenzindocyanine succinimidyl esters. Bioconjugate Chem., 1996, vol. 7, pp. 356–365. https://doi.org/10.1021/bc960021b
Mishra A., Behera R.K., Behera P.K., Mishra B.K., Behera G.B. Cyanines during the 1990s: A Review. Chem. Rev., 2000, vol. 100, no 6, pp. 1973–2012. https://doi.org/10.1021/cr990402t
##submission.downloads##
Опубліковано
Як цитувати
Номер
Розділ
Ліцензія
Авторське право (c) 2018 Вісник Одеського національного університету. Хімія
Ця робота ліцензується відповідно до Creative Commons Attribution-ShareAlike 4.0 International License.
Правовласниками опублікованого матеріалу являються авторський колектив та засновник журналу на умовах, що визначаються видавничою угодою, що укладається між редакційною колегією та авторами публікацій. Ніяка частина опублікованого матеріалу не може бути відтворена без попереднього повідомлення та дозволу автора.
Публікація праць в Журналі здійснюється на некомерційній основі. Комісійна плата за оформлення статті не стягується.